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TM 348 – Simmons Citrate Agar – Diferenciação de Enterobacteriaceae pela utilização de citrato
O Simmons Citrate Agar TM 348 é um meio de cultura seletivo utilizado para a diferenciação de Enterobacteriaceae com base na capacidade de utilizar citrato como única fonte de carbono. Amplamente recomendado em testes IMViC, ele permite identificar organismos capazes de metabolizar citrato, distinguindo-os daqueles incapazes de realizar esse processo.
A formulação é uma modificação do meio original de Koser, feita por Simmons, que adicionou ágar e azul de bromotimol para facilitar a leitura visual da reação. O meio é recomendado por padrões internacionais, incluindo APHA.
Características Técnicas
Sulfato de magnésio: 0,2 g/L Fosfato diácido de amônio: 1 g/L Fosfato dipotássico: 1 g/L Citrato de sódio: 2 g/L Cloreto de sódio: 5 g/L Azul de bromotimol: 0,08 g/L Ágar: 15 g/L Meio inclinado para testes IMViC Cor inicial: verde Cor positiva: azul (indicando alcalinização).
Princípio de Funcionamento
O citrato de sódio é a única fonte de carbono disponível no meio, enquanto o fosfato de amônio serve como única fonte de nitrogênio. Quando um microrganismo utiliza o citrato, ocorre a alcalinização do meio e o indicador azul de bromotimol muda de verde para azul.
A reação positiva é indicativa de microrganismos capazes de metabolizar citrato, como espécies do grupo Enterobacter e Klebsiella. Já organismos como Escherichia coli não conseguem utilizar citrato e mantêm o meio verde.
Aplicações
Diferenciação de Enterobacteriaceae
Testes IMViC
Identificação de microrganismos citrato-positivos
Controle de qualidade microbiológico
Análises em alimentos, água e amostras clínicas.
Modo de Preparo
Dissolver 24,28 g do meio em 1000 ml de água purificada ou destilada Aquecer até completa dissolução Distribuir em tubos ou frascos Esterilizar em autoclave a 121 °C por 15 minutos Ajustar o pH da água entre 6,5 e 7,0 antes do preparo Resfriar e solidificar em posição inclinada para formar o slant
FAQs
1. Qual o resultado esperado para uma cultura citrato-positiva?
O meio muda da cor verde para azul devido à alcalinização.
2. Escherichia coli cresce no Simmons Citrate Agar?
Não, E. coli é tradicionalmente citrato-negativa e não altera a cor do meio.
3. Por que o pH inicial da água é importante?
pH incorreto pode alterar a cor inicial do meio, prejudicando a interpretação do teste.
4.Para quais testes o meio é recomendado?
É essencial nos testes IMViC e na diferenciação entre Enterobacter e Escherichia.
5.O meio precisa ser preparado fresco?
Sim, pois mudanças de cor podem ocorrer em meio seco se armazenado por longos períodos.
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